canada cialis generic
canada cialis generic
Podczas syntezy około 1% oligonukleotydów nie przyłącza odpowiedniej zasady, co prowadzi do delecji. Skutkiem tego jest powstanie mieszaniny zawierającej poza oligonukleotydami o pełnej długości, również produkty syntezy skrócone i zawierające delecje. Wybór metody oczyszczania oligonukleotydów powinien uwzględniać więc ich długość, ich zastosowanie, oraz modyfikacje. Oligonukleotydy dłuższe niż 40 pz wymagają bardziej złożonej puryfikacji, co jednak skutkuje spadkiem końcowego stężenia oligonukleotydów.
Oligoukleotydy oczyszczone metodÄ… odsalania sÄ… odpowiednie dla reakcji PCR oraz sekwencjonowania.
W przypadku dłuższych, niemodyfikowanych oligonukleotydów zaleca się stosowanie metody oczyszczania na cartridge'u. Dla oligonukleotydów zawierających do 30 pz, metoda ta daje porównywalny efekt do oczyszczania metodą HPLC.
Dla takich zastosowań jak klonowanie, mutageneza oraz technika gel shift, dla których istotna jest konkretna długość produktu zalecane jest oczyszczanie metodą PAGE, gwarantującą najwyższy poziom oczyszczenia (90% oligonukleotydów o pożądanej długości). Jednakże podczas oczyszczania techniką PAGE może dojść do zakłócenia niektórych modyfikacji. Powinno unikać się stosowania fluoroforów, amidofosforynów, modyfikatorów aminokwasowych, biotyny, digoksygeniny, I-linker’ów, spacer’a 18, modyfikatorów tiolowych. W przypadku ich zastosowania przeprowadza się oczyszczanie metodą HPLC, IE-HPLC, RP-HPLC.
Jeśli potrzebują Państwo produktu o wysokiej czystości oraz stężeniu, dla oligonukleotydów o długości 50nt i więcej zalecana jest metoda oczyszczania HPLC. Proces oczyszczania jest kontrolowany i dokumentowany przez spektroskopię UV. Dzięki temu pobierany jest czysty produkt.







